기술 소개
Phage display 기술 소개
㈜인투앱의 재조합 항체 제작은 파지 디스플레이(Phage display) 기술을 이용하여 제작합니다.
파지 디스플레이는 1985년 G. Smith에 의해 처음 도입된 개념으로, 1990년 영국 MRC에 의해 처음으로 항체의 제조에 응용되었습니다. 박테리오파지(bacteriophage)란 대장균(Escherichia coli)에 기생하는 바이러스의 일종으로, 이 기술에서는 주로 실사형 박테리오파지 (filamentousbacteriophage)인 M13이 사용되고 있습니다.
Antibody Phage library의 제작 방법은 1) 중쇄(Haevy chain) 및 경쇄(Light chain) 가변영역(variable region)을 각각 PCR로 증폭시켜 scFv형태의 유전자 pool을 만들고 phagemid vector 안에 들어있는 파지 표면 단백질(pIII)에 융합이 될 수 있게 클로닝을 합니다. 2) 클로닝한 Phagemid vector를 대장균에 형질전환(transformation)을 합니다. 3) 형질전환된 대장균에 helper phage를 감염시키면, 파지의 표면에 다양한 조합의 scFv가 display된 항체 라이브러리(library)가 완성됩니다.
이러한 Phage display 기술은 기존 하이브리도마를 이용한 항체 제작보다 제작기간이 최소 4개월 이 상 단축되며, 사용되는 항원의 양도 최소 20배 이상 절약됩니다.
Global Antibody-Leader, YNTOAB
Phage display 기술을 이용한 항체 제작
Phage display 기술을 이용한 항체 제작은 크게 아래 3개의 단계로 나뉘어 집니다.
1. 항체 라이브러리 제작
라이브러리는 매번 제작하는 것이 아닌 제작 보유하고 있는 것을 활용하여 항체 제작을 진행하게 됩니다. (Human, Canine, Chicken Library 보유)
2. 항체 발굴(Panning & Screening)
Panning
Screening
3. 항체 생산(Cloning, Expression & Purification)
